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近期，隨著經(jīng)濟的復(fù)蘇，維生素類飼料添加劑銷售量大大增加，尤其是維生素E飼料添加劑，所以飼料中維生素E的檢測就顯得尤為緊急和重要。

賽智科技應(yīng)用檢測部參考國標(biāo)（GB/T 17812-2008），利用全新高性能的LC-10Tvp高效液相色譜儀經(jīng)實踐檢測可提供飼料中維生素E的HPLC檢測方案，得出的結(jié)果準確可靠，檢出限好，適用于配合飼料、濃縮飼料、復(fù)合預(yù)混合飼料、維生素預(yù)混合飼料中維生素E（dl-α-生育酚）的測定，僅供廣大用戶參考。

以下是維生素E的測定的詳細檢測方法。

1   儀器與試劑

1.1 儀器
　　LC-10Tvp高效液相色譜儀
　　Vertex 色譜柱?。?/span>150mm×4.6mm×5μm
　　分析天平，感量為0.0001g
　　 圓底燒瓶，帶回流冷凝器
　　恒溫水浴鍋
　　旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器
　　 超純水器

1.2  試劑

碘化鉀溶液。
　　淀粉指示液。
　　硫代硫酸鈉溶液。
　　水乙醚:不含過氧化物。
　　無水乙醇。
　　1,4-二氧六環(huán)。
　　甲醇，色譜純。
　　2,6-二叔丁基對甲酚（BHT）。
       氫氧化鉀溶液。
　　酚酞指示劑。
　　氮氣（純度99%）。
　　L-壞血酸。
　　維生素E（dl-α-生育酚）對照品。

2    試樣溶液的制備

2.1  皂化
　　稱取適量試樣，置入圓底燒瓶中，加L-壞血酸乙醇溶液，使試樣完全分散、浸濕，置于水浴上加熱直到沸點，用氮氣吹洗稍冷卻后，加氫氧化鉀溶液，混合均勻，在氮氣流下沸騰皂化回流，不時震蕩防止試樣粘附在瓶壁上，皂化結(jié)束，分別用無水乙醇、水自冷凝管頂端沖洗其內(nèi)部，取出燒瓶冷卻至40℃。

2.2 提取
　　定量的轉(zhuǎn)移全部皂化液于盛有無水乙醚的分液漏斗中，用蒸餾水分2次~3次沖洗圓底燒瓶并入分液漏斗，加蓋、放氣，隨后混合，激烈震蕩，靜置、分層。轉(zhuǎn)移水相于第二個分液漏斗中，分次用乙醚重復(fù)提取兩次，棄去水相，合并三次乙醚相。用蒸餾水多次洗滌乙醚提取液至中性，初次水洗時輕輕旋搖，防止乳化。乙醚提取液通過無水硫酸鈉脫水，轉(zhuǎn)移到棕色容量瓶中，加BHT使之溶解，用乙醚定容至刻度。

2.3 濃縮
　　從乙醚提取液中分取一定體積置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器燒瓶中，在部分真空、水浴溫度50℃的條件下蒸發(fā)至干或用氮氣吹干。殘渣用甲醇溶解并稀釋，離心或通過0.45μm過濾膜過濾，用于高效液相色譜儀分析。

3   色譜條件
　　色譜柱：Vertex 色譜柱　150mm×4.6mm×5μm；
　　流動相：甲醇+水=95+5；
　　流速：1.0mL/min;
　　溫度：室溫；
　　進樣量：20μL。

4   生育酚醋酸酯標(biāo)準品的高效液相色譜圖