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食品加工工藝和防腐的需要，以及為了改善食品品質(zhì)和色、味、香，在食品生產(chǎn)加工過程中，食品中通常會(huì)加入少量的天然或者化學(xué)合成的物質(zhì)。最近幾年，由于食品安全問題層出不窮，人們?cè)絹碓街匾暿称诽砑觿┧鶐淼陌踩[患。

賽智科技參考國(guó)標(biāo)（GB/T 23495-2009），利用全新高性能的LC-10Tvp高效液相色譜儀，經(jīng)實(shí)踐檢測(cè)可提供苯甲酸、山梨酸和安賽蜜、糖精鈉的HPLC檢測(cè)方案，得出的結(jié)果準(zhǔn)確可靠，檢出限好，適用于食品中苯甲酸、山梨酸和安賽蜜、糖精鈉的測(cè)定，僅供廣大用戶參考。

以下是苯甲酸、山梨酸和安賽蜜、糖精鈉的詳細(xì)檢測(cè)方法。

1　 儀器與試劑

1.1  儀器
　　LC-10Tvp高效液相色譜儀
　　Vertex 色譜柱　250mm×4.6mm×5μm；
　　超聲波水浴振蕩器；
　　食品粉碎機(jī)；
　　pH計(jì)；
　　天平：分度值為0.001 mg。

1.2 試劑
　　甲醇：色譜純。
　　乙酸銨溶液：稱取1.54 g乙酸銨，加水溶解并稀釋至1000 mL，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾。
　　亞鐵氰化鉀溶液：稱取106 g亞鐵氰化鉀[K3Fe(CN)6?3H2O]加水至1000 mL。
　　乙酸鋅溶液：稱取220g乙酸鋅[Zn(CH3COO)2?2H20]溶于少量水中，加入30mL冰乙酸，加水稀釋至l000mL。
　　氨水(1+1)：氨水與水等體積混合。

2　 色譜條件

色譜柱：Vertex C18柱，250mm x 4.6 mm，5μm；
　　流動(dòng)相：甲醇+0.02mol/l乙酸銨溶液(5:95)；
　　流速：1 mL／min；
　　進(jìn)樣量：20μL；
　　檢測(cè)波長(zhǎng)230nm。

3　 試樣溶液的制備

3.1 含脂肪、蛋白的樣品
　　稱取約10g左右樣品于燒杯中（固體樣品要用攪拌機(jī)攪碎），加入約60ml蒸餾水，再超聲波水浴振蕩10分鐘，然后用轉(zhuǎn)移到100ml比色管中，并用少量水潤(rùn)洗干凈燒杯；
　　加入5ml亞鐵氰化鉀溶液，搖勻，再加入5 mL乙酸鋅溶液，搖勻；
　　根據(jù)PH計(jì)讀數(shù)，用氨水調(diào)節(jié)PH至接近中性；
　　用水定容至100ml刻度，搖勻，用三角瓶,濾紙，玻璃棒，漏斗過濾；
　　吸取濾液約1.5ml，用微孔濾膜過濾，濾液待上機(jī)分析。

3.2 不含脂肪、蛋白的樣品
　　稱取約10g左右樣品于燒杯中（固體樣品要用攪拌機(jī)攪碎），加入約60ml蒸餾水，再超聲波水浴振蕩10分鐘，然后轉(zhuǎn)移到100ml比色管中，并用少量水潤(rùn)洗干凈燒杯；
　　根據(jù)PH計(jì)讀數(shù)，用氨水調(diào)節(jié)PH至接近中性；
　　用水定容至100ml刻度，搖勻，用三角瓶,濾紙，玻璃棒，漏斗過濾；
　　吸取濾液約1.5ml，用微孔濾膜過濾，濾液待上機(jī)分析。

注：1-安賽蜜；2-苯甲酸；3-山梨酸；4-糖精鈉；

                                    混合標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖
 

4　 結(jié)果分析
      4.1 儀器精密度的測(cè)定
　　取濃度為苯甲酸、山梨酸、糖精鈉、安賽蜜濃度為10.0ug/ml，平行測(cè)定7次。

表1：精密度的測(cè)定結(jié)果

分析結(jié)果可以得出，每個(gè)組分峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于1％，表明儀器在選定條件下重現(xiàn)性好，完全可以滿足分析測(cè)定的要求。

4.2  回收率的測(cè)定
分析結(jié)果的準(zhǔn)確度可以用回收率來衡量。回收率越接近100％，測(cè)得的結(jié)果越接近真值，即準(zhǔn)確度越好。同時(shí)平行測(cè)定結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差可以表明方法的重現(xiàn)性。

取清涼茶、樣品分別進(jìn)行加標(biāo)實(shí)驗(yàn)，加入苯甲酸、山梨酸、糖精鈉、安賽蜜濃度均為10.00ug/ml標(biāo)準(zhǔn)溶液，平行測(cè)樣7次，進(jìn)行回收率實(shí)驗(yàn)。測(cè)定結(jié)果見表2。

 表2：清涼茶的加標(biāo)測(cè)定結(jié)果和回收率

從上表可以看出清涼茶的加標(biāo)測(cè)定的回收率：苯甲酸為98.5%-103.4%，山梨酸為98.3%-103.1%，糖精鈉為97.5%-104.3%,安賽蜜為98.4%-103.3%。各組分的回收率都接近100%，滿足日常檢測(cè)的要求。